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共聚焦显微镜
TCS SP8 DLS共聚焦显微镜

TCS SP8 DLS共聚焦显微镜

宣布时候:2019-01-06 阅读次数: 将两种公用成像体系的上风合二为一:操纵 Leica TCS SP8 DLS (数字光片),您可在显微镜上操纵温和的单平面照明完成完整的共聚焦。经由进程研制出 TwinFlect 反光镜,咱们就能够将共聚焦平台 Leica TCS SP8 变为简略易用的多功效光片显微镜。

徕卡TCS SP8 DLS 连系光片与共聚焦手艺 Leica TCS SP8 DLS


将两种公用成像体系的上风合二为一:操纵 Leica TCS SP8 DLS (数字光片),您可在显微镜上操纵温和的单平面照明完成完整的共聚焦。经由进程研制出 TwinFlect 反光镜,咱们就能够将共聚焦平台 Leica TCS SP8 变为简略易用的多功效光片显微镜。

咱们转向接纳光片垂直安排设想。

 

黑腹果蝇眼睛绿色荧光卵白表征 (3P3 催化剂) 的色彩编码三维图集。样品来历:Nadja Dinges,Roignant Lab,IMB Mainz。

 


扩大选件


 ● 经由进程单平面照明加强细胞活性

 ● 操纵 sCMOS 摄像头察看疾速及时进程

 ● 样品处置简略,可停止多地位尝试

 ● 将共聚焦形式与光片显微镜手艺相连系,拓展新操纵范畴

 ● 两侧同时照明,消弭暗淡地区

 ● Leica TCS SP8 全系列一直能针对您的操纵找到抱负成像体例

 ● 将共聚焦平台变为光片显微镜。随时从 Leica TCS SP8 进级为 Leica TCS SP8 DLS

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光片垂直安排—若何将光片手艺引入共聚焦平台?

光片显微镜凡是须要在自力体系中装配公用的光学装配,此中照明和检测物镜彼此垂直安排。Leica TCS SP8 DLS 让光片显微镜变得很是的简洁。怪异的 TwinFlect 反光镜装配使照明光片偏转 90 度,从而将照明和检测光路集成到每台颠倒 Leica TCS SP8 的纵向轴中,同时又不就义共聚焦功效。

 


履行和记实持久察看

成像须要光照,但光照过强会毁伤细胞。光片显微镜是现今温和的成像计划,它可削减光毒性和光漂白组成的整体光毁伤。这会主动下降样品活性。在发育生物学中,温和光片成像特别有赞助:其光照强度低,摄取疾速,以便持久察看果蝇胚胎等敏理性发育生物体,并以及时三维体例领会构造和器官的组成进程。


Low phototoxicity and specimen imaging in 3D: Development of Drosophila melanogaster over six hours. Probe: Light-sensitive RFP. 3D rendering. 150 µm z stack, 30sec/stack.

 


光片成像道理

光片显微镜对样品停止单平面照明,很是合适敏感样品和疾速生物进程的成像。因为不存在离焦激起,可将光毒性的影响范围于焦平面上。这表现您还可主动取得光学切片,并在光片下挪动样品,从而完成样品 3D 成像。


 



多色持久察看


斑马鱼体侧线 17 小时发育进程。样品来历:Darren Gilmour,EMBL Heidelberg (斑马鱼 36hpf,CldnB:lynGFP/CXCR4B:nucTomato)

高速成像:斑马鱼跳动的心脏,转基因株系 flik1::EGFP。在 xytz 录制以后停止前期摄取对齐。录制速率:120 帧/秒。来历:Emily Steed,Vermot Lab,IGBMC Strasbourg,France。

 


以极佳的分辩率疾速摄取图象


您是不是须要以三维体例持久察看疾速周期性生物进程?DLS 模块便是您的不二挑选。发明斑马鱼心脏的律动之美。 

操纵 Leica TCS SP8 DLS,您可在两个尖真个 sCMOS 摄像头之间肆意挑选,以超卓的分辩率和高达 120 帧/秒的帧频停止疾速图象摄取:pco.edge sCMOS 摄像头和 Hamamatsu 推出的 ORCA-flash 4.0 V2 摄像头均已完整集成在 LAS X LightSheet Wizard 中。



追踪疾速的周期性活动

LAS X软件里新的 xytz 扫描形式可完成平面时候序列成像,并制成4D片子格局播放。该功效使得研讨者能够追踪那些没法在传统Z轴聚积延时拍照形式下捉拿到的疾速活动-比方斑马鱼心脏的跳动。


 


浩繁其余操纵上风

咱们的光片模块不只仅作为共聚焦显微镜的功效性插件。Leica TCS SP8 和数字光片相反相成,使您可随便扩大选件。您可在 LAS X 软件中便利地切换共聚焦和光片形式,操纵共聚焦手艺轻松操控样品。光转换或致伤尝试乃至后续的温和持久察看将变得非常简洁。

组分解像形式:在 Kaede 斑马鱼尾巴上的光转换 (405 nm 激光) 和致伤 (多光子激光) 尝试。移向伤口 (大片白色地区) 的光转换细胞 (小红点) 的延时录制。


被巨噬细胞愈合的伤口

4 日龄斑马鱼胚胎受伤后尾巴中的巨噬细胞 (mpeg1:Kaede)。样品来历:Francesca Peri,EMBL Heidelberg。

 

一直选用准确的激光

Leica TCS SP8 共聚焦显微镜的一切可见激光都可用于光片成像。白光激光在光片尝试中供给较大的矫捷性,以便挑选准确的染料。在多色尝试中,乃至可操纵光谱附近的荧光基团。

 


熟习的样品制备流程

Leica TCS SP8 DLS 接纳垂直尝试设置装备摆设,样品制备流程与您本来熟习的流程附近。样品封装在传统的玻璃底 Petri 培育皿中,可间接操纵。您乃至还可在多个尝试地位挑选多个样品:操纵共聚焦载物台主动化手艺在同一尝试设置装备摆设下完成多样品成像。独一的前提前提是:在样品两侧须要留出安排 TwinFlect 反光镜的空间。

 

Leica TCS SP8 DLS 的样品制备。样品包裹在玻璃底 Petri 培育皿的琼脂中。必须将过剩的琼脂断根清洁,以便为 TwinFlect 反光镜留出空间。

 


面向任务流的软件设想

LAS X 显微镜软件可慢慢指点用户完成数据记实和评价。面向任务流的设想可赞助用户高效操纵仪器。校准法式非常便利,可切确建立光片。 

样品两侧照明设想:两块 TwinFlect 反光镜绝对安排,使它们都可被扫描器对准,从而消弭暗淡地区。要在较大视场下取得清楚图象,可经由进程 LAS X 软件的 LightSheet Wizard 在线或离线融会选件将两幅图象融会在一路。 

LAS X 软件另有很多附加软件包,您可按照本身的需要停止定制。LAS X 三维可视化模块可完成直观剪辑、疾速衬着和平面显现,以新奇的体例交互处置三维数据。“拼贴图”尝试可赞助您察看大片地区,而“标记和查找”尝试可在多地位设置下察看多个相干地区。

 


 

优良的光学器件

合适各种操纵的优良物镜是徕卡公司最明显的标记之一。垂直安排光片体系的焦点由物镜和 TwinFlect 反光镜装配组成。您可按照您的尝试请求在两种照明物镜间肆意挑选 - Leica HC PL Fluotar 2.5x/0.07 和 Leica HCX PL FLUOTAR 5x/0.15,以此建立所需的光片。要揭示最细小的细节或取得更大的视场,您可挑选咱们的检测物镜:Leica HC FLUOTAR L 25x/0.95 W 或 Leica HC APO L 10x/0.3 W 水浸物镜。

 


便利的数据处置

持久 3D 察看进程会发生大批数据。LAS X 软件中集成了多种东西,可便利地办理这些数据。操纵在线融会东西,您可挑选保留原始数据,或仅保留融会图象以节流磁盘空间。摄取时将主动保管数据,而借助智能加载功效可便利地检查数据,间接拜候大延时数据集合的特按时候点或相干 Z 轴仓库。您可在管线中编译所需的前期处置步骤,它们将主动处置。

 



软件节制的天气室

软件节制的天气室可坚持最适合样品的情况前提。用户可操纵 LAS X 情况节制模块完成对尝试前提的周全节制。在尝试进程中,可监控所记实的情况数据。您可在同一个界面设置一切情况前提,并运转温度曲线,比方,热打击尝试的温度曲线。



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