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冰冻切片的道理及其优错误谬误

宣布时候:2019-05-06 阅读次数:1846次




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冰冻切片是将新颖样品当即在液态氮或其余制冷剂中间接冰冻或经化学牢固后的样品再冰冻,置于高温下敏捷解冻到达必然的硬度后间接停止切片的一种体例。今朝,冰冻切片首要用于临床病理疾速诊断和局部形状学研讨性任务中。

领会冰冻切片的道理能够更好地利用在临床病理取材中,也便于在临床讲授中更好地进修与理论。本文就冰冻切片的道理和其优错误谬误停止简略的论述。



冰冻切片的道理


构造颠末冷冻后,其内的水分结冰,起到了包埋剂的感化,使构造变硬,有益于切成薄片。其进程比拟简略,无需颠末脱水和通明步骤,构造经牢固或不牢固都可切片,普通亦可切成几微米的薄片。因为构造不经溶剂处置,不受试剂的激烈安慰及温度的影响,以是构造不明显的缩短,细胞形状不大的转变,脂肪和类脂也能较好保管。如许,冰冻切片除对外科手术中的疾速诊断非常成心义外,在构造化学、免疫构造化学、免疫定位、原位杂交、酶定位及动物微管研讨中也被普遍地利用。



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和其余几种切片体例比拟,冰冻切片有着怪异的优胜性,但也有必然的范围性。


长处


1)简洁,疾速,用时短。在临床上,手术的摘出物需迟缓诊断时,用此法从接纳标本到切片制成,能够在15min以内实现。切片前能够不须要对构造牢固、脱水、通明、包埋等手续便可停止切片,削减了一些中间关键。

2)构造变更不大。能较好地保管脂肪、类脂等成份;在免疫构造化学研讨中有益于构造抗原性的保管;有些研讨为了保管某些酶的活性也须要接纳此法。出格是对那些对无机溶剂或热的温度耐受才能较差的细胞膜外表抗原和水解酶保管较好。



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错误谬误


1)不轻易做持续切片和较薄的切片。

2)构造块在解冻进程中发生的冰晶影响细胞的形状布局及抗原物资的定位。构造布局不如白腊切片好,切片较厚、不易获得很好的持续切片,且操纵时轻易破裂(易破裂的样品在冰冻前可用10%明胶或2%琼脂糖包埋)。因为构造内的水分起到包埋剂的感化,在构造冰冻的进程中,一旦冰晶的焦点构成,它们就逐步收缩,并粉碎一切环绕它们的细胞器。当冰冻的构造切片贴到玻片上时,冰晶熔化,在构造上留下很多孔状的空地。因为水在-4℃时体积最大,构造内构成冰晶的数目则与构造冷冻的速率成正比,是以,要尽能够防止迟缓的冷却。使构造的温度敏捷降到-4℃以下,并且送检做冰冻切片的构造应尽能够地新颖和防止过分的湿润。用湿的盐水纱布包裹构造会使切片呈现严峻的报酬假像及大批的冰晶孔隙,不只形成诊断的坚苦,也使各类特别请求的染色难以停止。


在临床理论中,连系须要,挑选适合的切片体例,进步诊断的精确性显得尤其主要。

 


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